Site-directed mutagenesis Service
Nutzen Sie auch unseren Site-directed mutagenesis Service. Dazu benötigen wir 5 µg ihrer DNA.
Site-directed mutagenesis Service includes: |
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multi site directed mutagenesis |
- Bacterial transformation & clone selection |
- Double-strand sequencing of selected clone |
Deliverables: 2 to 5 ug purified plasmid with gene insert and sequencing data |
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Assemblierung
Neben der Qualität der eingesetzten Oligonukleotide liegt ein weiteres Problem in der Assemblierung der einzelsträngigen Bausteine zu längeren doppelsträngigen DNA-Fragmenten. Vielfach ist es unmöglich, die Bildung von Sekundärstrukturen zu vermeiden, welche beispielsweise durch inverted repeats, einen aussergewöhnlich hohen oder niedrigen GC-Gehalt oder durch repetitive Strukturen verursacht werden. Üblicherweise müssen diese Probleme durch ein modifiziertes und dadurch wiederum aufwendigeres Design, z.B. bei der Assemblierung von Subfragmenten, gelöst werden. Vielfach wird aber auch eine Anpassung der Codon-Usage verwendet, um solche sequenzabhängigen Schwierigkeiten zu eliminieren und so die Synthese eines Fragmentes zu ermöglichen. Ein Kompromiss zur optimalen Protein Expression, in einem vorbestimmten, Expressionssystem, muss dabei manchmal in Kauf genommen werden.
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